Hibridación fluorescente in situ para la detección diferencial de Yersinia spp.

Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis y Y. pestis son patógenos de gran importancia médica y responsables de un número considerable de infecciones cada año. La detección de estas especies sigue dependiendo de métodos de cultivo, que son lentos, tediosos y a menudo se encuentran limitados por la presencia de flora acompañante. En este estudio se utilizó la hibridación fluorescente in situ (FISH) para desarrollar una alternativa rápida, sensible y fiable que detecte bacterias viables en los alimentos.

Para este propósito, se utilizaron sondas altamente específicas dirigidas al ARN ribosómico 16S y 23S para detectar de manera diferenciada cada una de las tres especies. Con el fin de permitir la diferenciación de polimorfismos de nucleótido único (SNPs), se utilizaron oligonucleótidos competidores adecuados y ácidos nucleicos bloqueados (LNAs). Las células afectadas mostraron una señal fuerte y el recuento viable directo (DVC) combinado con FISH optimizó la discriminación entre células vivas/muertas. La sensibilidad de la prueba FISH fue alta e incluso se detectó una sola célula por gramo de carne picada de cerdo en un día, lo que demuestra su utilidad para identificar los peligros transmitidos por los alimentos en una etapa temprana.

En conclusión, las pruebas FISH realizadas resultaron ser herramientas prometedoras para compensar los inconvenientes existentes en la detección convencional con métodos de cultivo de estos importantes agentes zoonóticos.