ELISA competitivo para diferenciar anticuerpos PCV2 de la mezcla de anticuerpos PCV1/PCV2 en sueros de cerdos
Shuizhong Han, Yan Xiao, Dingding Zheng, Yanli Gu, Yajie Xuan, Yudan Jin, Wenqiang Pang, Yuxin Huang, Xiangdong Li, Junhua Deng, and Kegong Tian. Establishment and application of a competitive enzyme-linked immunosorbent assay differentiating PCV2 antibodies from mixture of PCV1/PCV2 antibodies in pig sera. BMC Veterinary ResearchBMC series. DOI: 10.1186/s12917-016-0802-9
19-jul-2017 (hace 7 años 3 meses 14 días)Tanto el PCV1 como el PCV2 circulan en las explotaciones porcinas de China y los cerdos infectados desarrollan anticuerpos frente a ambos virus. Los actuales kits comerciales disponibles de ELISA no pueden diferenciar anticuerpos específicos de PCV2 a partir de las mezclas de anticuerpos PCV1 y PCV2 en cerdos PCV1/2 infectados o cerdos vacunados contra el PCV2, por lo tanto, se hace necesario y urgente desarrollar métodos ELISA específicos para PCV2 para evaluar el nivel de anticuerpos PCV2 en exclusión de la interferencia de anticuerpos frente a PCV1 después de la vacunación contra PCV2.
Partículas similares al virus (VLP) de PCV2 basadas en la proteína recombinante Cap se expresaron en Escherichia coli. Se estableció un ELISA competitivo mediante el uso de las VLP como antígeno de recubrimiento y el anticuerpo monoclonal específico de PCV2 como el anticuerpo competidor. El ELISA competitivo se comparó con los resultados obtenidos mediante el uso de un ensayo de inmunoperoxidasa en monocapa en 160 muestras de suero. La sensibilidad y especificidad de este ELISA competitivo fue del 96,5 y 96,0%, a 2 desviaciones estandar de la media o 91,8 y 100% a 3 desviaciones estándar de la media. Posterioremente, se realizó un estudio serológico con 1297 muestras de suero de cerdos vacunados procedentes de explotaciones comerciales de las provincias de Beijing, Hunan y Henan en China. Los resultados mostraron que un 85,9% de los sueros eran positivos para anticuerpos frente a PCV2.
El ELISA competitivo desarrollado en este estudio fue la vez sensible y específico para PCV2 y adecuado para el control a gran escala de anticuerpos frente a PCV2 en exclusión de la interferencia de anticuerpos frente a PCV1 después de la vacunación contra PCV2.