El examen del semen al microscopio

El examen del semen a través del microscopio es una fase esencial de la inseminación ya que será a partir de esta observación que decidiremos si utilizar o no el semen recogido. Lo primero a observar será el porcentaje de espermatozoides vivos así como su motilidad. Para poder realizar esta observación es preciso disponer de un microscopio de buena calidad y poder controlar la temperatura durante el examen a través de una platina térmica.

 

Laboratorio y equipo laboratorial

El laboratorio debe responder a varios imperativos:

• No debe ser muy espacioso ya que sólo se destinará a este único uso.
• Las superficies deberán ser fácilmente lavables y desinfectadas como por ejemplo suelos y paredes embaldosadas, paredes pintadas con pintura lavable o fregadero embaldosado o con recubrimiento sintético.
• Tener armarios para poder guardar todo el material.
• Con mucha luz para poder trabajar adecuadamente.
• Mantener una temperatura estable entre 20 y 25 ºC durante todo el año.

Plano de un laboratorio

Laboratorio luminoso y fácil de limpiar

 

Examen microscópico

1. Preparación del portaobjetos.

• Una vez recogido el semen, debe permanecer durante varios minutos en la cámara a 37 °C. Cámara caliente • Una vez en el laboratorio, la persona encargada de realizar el control deberá retirar la gasa o el filtro que retiene la tapioca y examinar el color del semen y la eventual presencia de sangre. El color debe ser un color blanco «crema» homogéneo. Examen físico del semen • Durante todo el examen microscópico el semen se mantendrá a 35 °C al baño María habiendo comprobado previamente la temperatura durante la recogida para evitar un choque térmico.   Semen al baño María Toma de temperatura mediante termómetro digital • Para realizar un examen de forma correcta sólo se necesita una pequeña cantidad de semen con el objetivo de evitar la presencia de "capas" de espermatozoides. Para obtener la cantidad correcta se puede utilizar la técnica de las 3 gotas tras haber introducido un agitador de vidrio en el semen o bien utilizar un tubo capilar o bien una micropipeta automática.   La técnica de las 3 gotas permite tener una pequeña cantidad a examinar El tubo capilar es muy fácil de utilizar La micropipeta ajustable es un instrumento multifuncional muy práctico • Una vez tenemos la muestra, se cubre con el cubreobjetos y se coloca sobre la platina del microscopio. Para no obtener valores falsos de motilidad debemos: Trabajar con un portaobjetos limpio. Verificar que los oculares están limpios. Precalentar el portaobjetos y cubreobjetos sobre la platina a 37 °C antes de depositar el semen. Examinar el semen en un microscopio equipado con una platina térmica integrada con un termómetro digital para controlar la temperatura.   Microscopio equipado con platina térmica integrada

2. La puntuación «en teoría»

El examen del semen se realiza a 200 aumentos y el operario debe poder evaluar el movimiento de los espermatozoides.

• Los espermatozoides inmóviles se consideran como muertos. La estimación de espermatozoides vivos se basa en la estimación inicial del número total de espermatozoides de un campo al microscopio (80 a 100) menos el recuento visual en ese campo de los espermatozoides inmóviles. Esta medida se realiza en varios campos sucesivos (5). Debido a la dificultad de realizar esta estimación, la nota se da en porcentajes de 10%: 60%, 70%, 80% o 90%. • La motilidad se basa en la estimación del desplazamiento de los espermatozoides vivos partiendo del principio según el cual cuanto más rápido y rectilíneo sea el desplazamiento mayor será su potencial fecundante (ver la maduración epididimaria, capítulo 2).   Puntuación 1: Ligero temblor de los espermatozoides. Puntuación 2: Trayectos sinuosos con desplazamiento muy lento. Puntuación 3: Trayectos sinuosos con desplazamiento bien visible. Puntuación 4: 50% de trayectos rectilíneos con un desplazamiento muy rápido. Puntuación 5: 100% de los trayectos rectilíneos con un desplazamiento muy rápido

3. La puntuación «a la práctica»

Realizar el examen de motilidad no se aprende en los libros ya que necesita mucha práctica. Cuando uno se inicia en este campo siempre le surgen dudas: ¿La temperatura es la correcta?, ¿He esperado el tiempo suficiente?….. Para sacarnos de dudas podemos realizar nuevamente el examen mezclando una gota de una solución de cafeína (0,4%) en la muestra. Verter una gota de cafeína sobre el portaobjetos precalentado al lado de la gota de semen y esperar varios segundos. Mezclar las dos gotas. Cubrir con el cubreobjetos. Examinar rápidamente (1 min) la motilidad. La cafeína estimula el movimiento de los espermatozoides y permite apreciar su potencial, encubierto algunas veces por el propio azar del examen.

 

Puntuación de 3,5 a 4	Puntuación de 3	Puntuación de 3
Puntuación de 2	Puntuación de 2	Puntuación de 2
Puntuación de 1	Puntuación de 1	Puntuación de 0 a 1

 

¡¡¡A tener en cuenta!!!

A continuación se presentan 3 muestras de semen clasificado según porcentaje de espermatozoides vivos y motilidad. Precisar que no se trata de tener en cuenta las anomalías ni la higiene del semen. Se observan espermatozoides aglutinados («en paquetes») que se consideran como muertos:

 

Puntuación de 3 y 90 % de vivos

Puntuación de 4 y 90 % de vivos

Puntuación de 2 y 50 % de vivos