Aislamiento de Haemophilus parasuis

Aunque Haemophilus parasuis puede detectarse en muestras clínicas mediante PCR, su aislamiento, en ocasiones difícil, es necesario para la caracterización adicional de los aislados mediante serotipado y genotipado. Los factores que afectan sobre el éxito de su aislamiento incluyen la selección de animales para obtener muestra y el tratamiento de dichas muestras antes de ser enviadas al laboratorio. A continuación se describen los procesos que permitirán mejorar la obtención de muestras y su tratamiento para poder finalmente realizar el aislamiento.

Selección de los animales

Se debe tener en cuenta que:

Raramente puede aislarse de animales muertos y de animales con afección crónica. Se puede intentar con muestras de cerdos sacrificados no tratados que muestran signos clínicos característicos de infección aguda. Sin embargo, las mejores muestras son las procedentes de animales con problemas respiratorios (respiración abdominal, tos) y articulaciones hinchadas aunque también pueden considerarse los animales con signos del sistema nervioso central.

Selección de las muestras

Debido al hecho que H. parasuis es un organismo comensal del tracto respiratorio superior se puede aislar de la cavidad nasal, tonsilas y tráquea de animales sanos aunque es preferible tomar muestras de órganos diferentes del tracto respiratorio. Las muestras ideales para aislarlo son el cerebro (meninges), pericardio, pleura, peritoneo y articulaciones. En caso de observar pleuritis fibrinosa pueden tomarse muestras de tejido pulmonar. Aunque H. parasuis puede causar septicemia y estar presente en la sangre durante la infección aguda, es poco frecuente aislarlo de este tipo de muestras en los casos de campo.

Recogida de muestras

Las muestras deben recogerse de órganos con exudado fibrinoso en la superficie mediante escobillones estériles o bien de articulaciones, peritoneo, pericardio y cavidad torácica mediante jeringuillas estériles. Las muestras se deben refrigerar inmediatamente después de la recogida. Deben ser transportados utilizando un medio Amies.

Transporte al laboratorio

Teniendo en cuenta que H. parasuis es un organismo termosensible, organismos viables pueden ser imperceptibles en medio salino fisiológico a 42°C en el plazo de 1 hora, a 37°C en 2 horas y a 25°C en 8 horas. Sin embargo, a 4 ºC puede sobrevivir durante un periodo relativamente largo. Las muestras para analizar deben ser recibidas por el laboratorio entre 1 a 2 días tras su recogida. Tanto los escobillones, como muestras de tejidos o jeringuillas con fluidos corporales deben transportarse en un envase de poliestireno extruído con hielo. Para los tejidos no es necesaria la utilización de formalina.

Pruebas de diagnóstico

Primero debe realizarse una identificación bioquímica. Es posible caracterizar los aislados mediante serotipado y genotipado. Cuando se hace imposible realizar el aislamiento, la detección de H. parasuis de muestras clínicas mediante PCR puede ser útil para definir el papel de este agente en la mortalidad que afecta a la explotación.