Diagnóstico laboratorial: Salmonella

Test disponibles:

Cultivo bacteriano

• Aislamiento de organismos vivos en tejidos con lesiones.
• Tipos de muestra: heces, sangre, bazo, pulmón, hígado, linfonodos.
• Pros:
  • Las bacterias son fáciles de cultivar en 1 o 2 días en casos agudos.
  • Fácil de hacer en cualquier laboratorio (incluso interno).
  • Coste relativamente bajo.
• Contras:
  • El enriquecimiento selectivo puede ser necesario para las muestras de sangre.
  • Si los cerdos han sido tratados previamente con antibióticos, esto puede impedir el crecimiento bacteriano.
  • Las heces no son fiables para diagnosticar casos sistémicos.
  • La excreción de la bacteria no es constante; sino intermitente en el tiempo.

Susceptibilidad antimicrobiana (antibiograma)

• Test in vitro: capacidad de un organismo vivo para crecer bajo concentraciones específicas de diferentes antimicrobianos.
• Tipos de muestra: heces, sangre, bazo, pulmón, hígado, linfonodos.
• Pros:
  • Identificación de susceptibilidad o resistencia de cepas específicas a antimicrobianos comunes.
  • Identificación de tendencias de resistencia a los antimicrobianos.
• Contras:
  • Requiere un aislado bacteriano.
  • Las pruebas in vitro pueden diferir ligeramente de los resultados in vivo.
  • Es posible que algunos antimicrobianos específicos no se incluyan o requieran pruebas especiales separadas.
  • Coste moderado.

Serotipado bacteriano

• La seroagrupación se basa en la identificación de diferentes antígenos O y H en aislados de Salmonella.
• Pros:
  • El serotipado puede realizarse mediante:
    • Uso de diferentes antisueros.
    • Una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que detecta la presencia de secuencias específicas de ácidos nucleicos (ADN) asociados con antígenos específicos.
    • Uso de microarrays para detectar secuencias específicas de ADN para antígenos específicos.
  • Ayuda a identificar la patogenicidad del aislado bacteriano en función del serotipado asociado con antígenos específicos.
• Contras:
  • Requiere un aislado bacteriano.
  • Coste moderado.

Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA)

• Detecta la presencia de anticuerpos.
• Tipos de muestras: suero o fluidos orales.
• Pros:
  • Los animales permanecen positivos durante varias semanas.
  • Puede utilizarse en casos crónicos.
  • Se pueden usar muestras pareadas para confirmar una infección reciente.
• Contras:
  • Los anticuerpos específicos y el momento de la detección pueden variar ligeramente entre los distintos kits comerciales disponibles.
  • Los animales pueden tardar desde solo 3 o 4 días a más de 3 semanas en volverse seropositivos; el tiempo varía según el serotipo y la dosis de exposición.
  • No distingue entre vacunación e infección por bacteria de campo.
  • No se produce una respuesta serológica consistente a la infección; diferentes serotipos y diferentes dosis de infección influyen en la respuesta inmunitaria.
  • Los anticuerpos maternales pueden complicar la interpretación de los resultados al principio de la transición.

Interpretación de resultados:

Cultivo bacteriano:

• Cantidad:
  • Moderada a alta: altamente sugestivo de que está contribuyendo a la enfermedad.
  • Baja: valor cuestionable (podría ser un contaminante o un serotipo no patógeno)
  • Sin crecimiento: animal posiblemente tratado previamente con antibióticos, no se produce excreción en ese momento (excreción intermitente) o la bacteria no está contribuyendo a la enfermedad.

Susceptibilidad antimicrobiana (antibiograma):

• Susceptible: posible buena elección para el tratamiento si el antimicrobiano puede llegar al tejido diana.
• Resistente: hay que seleccionar un antimicrobiano diferente.
• MIC: si se realiza la MIC (mínima concentración inhibitoria) hay que asegurarse que el antimicrobiano seleccionado alcanza el valor MIC indicado en el órgano diana.

Serotipado:

• El serotipado permite agrupar por serotipos, lo cual es muy valioso para identificar la importancia del aislado.

Tabla con los serotipos más comunes de Salmonella y sus respectivos serogrupos.

Grupo B	Grupo C1	Grupo D
Derby	Choleraesuis	Dublin
Heidelberg	Infantis	Enteritidis
Typhimurium	Newport

ELISA

• Positivo:
  • Exposición anterior a vacuna o bacteria de campo.
  • Se pueden usar muestras de suero pareadas con dos o tres semanas de diferencia para confirmar una infección reciente.
• Negativo:
  • Negativo a vacuna o bacteria de campo.
  • Infección demasiado reciente para ser detectada.
  • Dosis de exposición baja.
  • Infección con serotipos leves.
  • El uso de antibióticos puede inhibir el crecimiento bacteriano, lo que resulta en una dosis de exposición más baja y una menor respuesta inmunitaria.

Escenarios:

Cerdos de engorde con diarrea (aguda o crónica):

• Recoge muestras fecales de 10 o más cerdos con diarrea no tratados con antibióticos y envíalas para cultivo bacteriano y sensibilidad en pooles de 5.
• Enviar para serotipado las muestras positivas a Salmonella.

Cerdos de engorde con enfermedad sistémica (con o sin diarrea):

• Necropsia 1-3 cerdos muertos recientemente o eutanasia cerdos con diarrea. Recoge muestras de tejidos para cultivo bacteriano (bazo, hígado, linfonodos gastrohepáticos).

Determinación del momento de exposición:

• Recoge muestras de 10-15 cerdos a las 8, 12, 16 y 20 semanas de edad:
  • Dos enfoques para el muestreo:
    • Transversal – recoge de diferentes grupos de edad a la vez (se obtienen resultados más rápido).
    • Longitudinal – recoge de los mismos cerdos a lo largo del tiempo (se obtienen resultados más precisos para la interpretación serológica).
• Análisis individual de muestras de suero mediante ELISA.
• Enviar muestras fecales para cultivo bacteriano y sensibilidad en pooles de 5 según el grupo de edad.
• Enviar para serotipado las muestras positivas a Salmonella.