ELISA para la monitorización de la cepa C de la PPC post vacunación
Wang, L., Mi, S., Madera, R. et al. A neutralizing monoclonal antibody-based competitive ELISA for classical swine fever C-strain post–vaccination monitoring. BMC Vet Res 16, 14 (2020). https://doi.org/10.1186/s12917-020-2237-6
10-mar-2020 (hace 4 años 8 meses 14 días)La prueba de neutralización de virus (VNT) se usa ampliamente para el estudio serológico de la peste porcina clásica (PPC) y la evaluación de la eficacia de las vacunas contra la PPC. Sin embargo, VNT es un procedimiento lento que requiere cultivo celular y manipulación de virus vivos. La vacuna de cepa C de PPC es la más utilizada para el control y prevención de la PPC. En este estudio, se presenta un ensayo de inmunosorción enzimática competitiva (cELISA) basado en anticuerpos monoclonales neutralizantes (mAb) con el énfasis en el reemplazo de VNT para la monitorización post vacunal de cepa C.
Se generó un anticuerpo monoclonal (6B211) con una potente actividad neutralizante contra la cepa C. Se estableció y optimizó un nuevo cELISA basado en la estrategia de que 6B211 puede competir con los anticuerpos neutralizantes inducidos por la cepa C en el suero de cerdo para unirse al antígeno de captura E2 de la cepa C. Al analizar los sueros de cerdo VNT negativos para la cepa C (n = 445) y los sueros de cerdo positivos para VNT con la cepa C (n = 70), el cELISA basado en 6B211 mostró una sensibilidad del 100% (intervalo de confianza del 95%: 94,87 a 100%) y 100% especificidad (intervalo de confianza del 95%: 100 a 100%). Los anticuerpos de la cepa C en cerdos se pueden analizar con el cELISA desde los 7 días posteriores a la vacunación. Al testar los sueros de cerdo (n = 139) en paralelo, el cELISA mostró una excelente concordancia (Kappa = 0,957) con VNT. La tasa de inhibición de las muestras de suero en el cELISA está altamente correlacionada con sus títulos en VNT (r2 = 0,903). Además, los intra e inter ensayos del cELISA exhibieron una repetibilidad aceptable con bajo coeficiente de variaciones (CV).
Este nuevo cELISA demostró una excelente concordancia y un alto nivel de correlación con VNT. Es una herramienta segura para la monitorización serológica de la campaña de vacunación contra la cepa C al ser una prueba rápida, simple, segura y rentable que puede usarse para el control de la respuesta inmune inducida por la vacuna a nivel de población.