Detección y diferenciación del virus de la diarrea epidémica porcina (DEPV) y la gastroenteritis transmisible (GET)
O. Kim, C. Choi, B. Kim, C. Chae : Detection and Differentiation of Porcine Epidemic Diarrhoea Virus and Transmissible Gastroenteritis Virus in C
17-may-2001 (hace 23 años 7 meses 30 días)Se desarrolló un procedimiento
RT-PCR multiplex para la detección
simultanea del virus de la diarrea
epidémica porcina (DEPV) y el virus
de la gastroenteritis transmisible
(GET) en cerdos pre-destete con
diarrea.
Se escogieron genes de la membrana
del virus de la DEPV y genes de la
nucleocápsida del virus de la GET.
Los productos de la PCR del virus
DEPV y GET tuvieron tamaños moleculares de 412 y 612 parejas de bases respectivamente. Los iniciadores de DEPV no reaccionaron con ningún virus del GET analizado y viceversa. Además, los iniciadores no reaccionaron con ningún otro virus porcino.
El RT-PCR multiplex pudo detectar 10 TCID50 (dosis infecciosa de cultivo de tejido 50%)/ml de DEPV o GET con cada uno de los grupos de iniciadores para DEPV y GET respectivamente. Los RNA de DEPV y GET se detectaron directamente en las muestras intestinales y fecales de cerdos infectados de forma experimental con cualquiera de los dos virus.
Los resultados de la prueba se correlacionaron bien con los resultados del aislamiento de los virus. Ninguna de las 5 muestras control fue positiva. Se detectó DEPV en 10 muestras intestinales y 9 muestras fecales, y entre las 9 muestras fecales positivas, dos fueron cultivo-negativas. Se detectó GET también en 10 muestras intestinales y 9 muestras fecales, y entre las 9 muestras fecales, 3 fueron cultivo-negativas.
El RT-PCR multiplex pudo detectar 10 TCID50 (dosis infecciosa de cultivo de tejido 50%)/ml de DEPV o GET con cada uno de los grupos de iniciadores para DEPV y GET respectivamente. Los RNA de DEPV y GET se detectaron directamente en las muestras intestinales y fecales de cerdos infectados de forma experimental con cualquiera de los dos virus.
Los resultados de la prueba se correlacionaron bien con los resultados del aislamiento de los virus. Ninguna de las 5 muestras control fue positiva. Se detectó DEPV en 10 muestras intestinales y 9 muestras fecales, y entre las 9 muestras fecales positivas, dos fueron cultivo-negativas. Se detectó GET también en 10 muestras intestinales y 9 muestras fecales, y entre las 9 muestras fecales, 3 fueron cultivo-negativas.