Diagnóstico laboratorial: Peste porcina clásica (PPC)
04-feb-2022 (hace 2 años 9 meses 17 días)
Test disponibles
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
- Detecta la presencia de secuencias específicas de ácido nucleico viral (ARN).
- Tipos de muestras: suero o tejidos.
- Pros:
- Método más sensible y preferido para detectar el agente.
- A menudo se pueden agrupar muestras para reducir el coste y minimizar la pérdida de sensibilidad.
- Contras:
- Coste moderado.
- Requiere primers (cebadores) adecuados.
Anticuerpos fluorescentes (FAT)
- Detecta la presencia de virus.
- Tipos de muestras: tejidos, especialmente tonsilas.
- Pros:
- Buena sensibilidad.
- Contras:
- No distingue entre vacunación e infección por virus campo.
- Las vacunas vivas modificadas pueden dar lugar a FAT positiva durante aproximadamente 2 semanas.
- No es factible para un gran número de muestras.
- Los resultados dependen de la cepa vírica usada en la prueba.
- La fiabilidad depende mucho de la habilidad de los técnicos.
- No distingue entre vacunación e infección por virus campo.
Inmunoperoxidasa diferencial usando anticuerpos monoclonales (MAbs)
- Detecta la presencia del agente.
- Tipos de muestras: tonsila u otro órgano FAT-positivo.
- Utiliza una serie de tres anticuerpos monoclonales (MAbs) diferentes para distinguir entre vacunación, infección por virus de campo y otros Pestivirus.
- Pros:
- Permite distinguir entre vacunación, infección por virus de campo y otros Pestivirus.
- Contras:
- Costo moderado a alto.
- Requiere una muestra de tejido FAT positiva.
- Los resultados dependen de los tres MAbs distintos y un anticuerpo policlonal (PAbs) usados en la prueba.
- MAbs que reconocen todas las cepas víricas de la PPC.
- MAbs que reconocen todas las cepas vacunales para la PPC usadas en ese país.
- MAbs que reconocen virus de la diarrea bovina (BVD) y de la enfermedad de la frontera o de Border (BD).
- PAbs que reconocen PPC.
- No es factible para un gran número de muestras.
- La fiabilidad depende mucho de la habilidad de los técnicos.
Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA)
- Detecta la presencia de anticuerpos.
- Tipos de muestras: suero.
- Pros:
- Los animales permanecen positivos durante varias semanas.
- Puede utilizarse en casos crónicos.
- Puede utilizarse para diferenciar la exposición al virus de campo de la vacuna con genes delecionados.
- Cualquier resultado positivo al virus de campo se considera significativo.
- Contras:
- Si es posible, se debe hacer coincidir el ensayo adecuado con la deleción de genes apropiada en la vacuna (generalmente E2).
- Los animales tardan al menos 21 días en volverse seropositivos.
- Puede darse reactividad cruzada con otros Pestivirus.
Neutralización viral (VN)
- Detecta la presencia de anticuerpos.
- Tipos de muestras: suero.
- Pros:
- Los animales permanecen positivos durante varias semanas.
- Puede utilizarse en casos crónicos.
- Mayor sensibilidad que ELISA (puede detectar una menor concentración de anticuerpos).
- Contras:
- No es factible para un gran número de muestras.
- Los animales tardan al menos 21 días en volverse seropositivos.
- No distingue entre vacunación e infección por virus campo.
- La fiabilidad depende mucho de la habilidad de los técnicos.
- La reactividad depende de la cepa vírica utilizada.
- Puede darse reactividad cruzada con otros Pestivirus.
Interpretación de resultados:
PCR
- Positivo: El virus de campo o la cepa vacunal está presente.
- Negativo: Negativo o el virus no se detecta si la prueba se realiza mucho después de la infección.
FAT
- Positivo: El virus de campo o la cepa vacunal está presente.
- Negativo: Negativo o el virus no se detecta si la prueba se realiza mucho después de la infección.
Inmunoperoxidasa con MAbs
- Positivo: Ver tabla 1.
- Negativo: Negativo o el virus no se detecta si la prueba se realiza mucho después de la infección.
Tabla 1. Interpretación de los resultados de la prueba de la inmunoperoxidasa diferencial usando anticuerpos monoclonales (MAbs). Fuente: OIE.
| Anticuerpo policlonal | Anticuerpo monoclonal específico para | Interpretación | ||
|---|---|---|---|---|
| Cepa PPC | Cepa vacunal PPC | Cepa BVD/BD | ||
| + | + | — | — | cepa de campo de PPC |
| + | + | + | — | cepa vacunal de PPC |
| + | — | — | + | cepa de BVD/BV |
| + | — | — | — | Otros virus no PPC Pestivirus* |
* Siempre debe tenerse en cuenta la existencia de nuevas cepas de PPC y cualquier aislado de casos sospechosos de PPC debe enviarse a un laboratorio de referencia de la OIE.
ELISA
- Positivo: Anticuerpos maternales o exposición anterior (>21 días) a vacuna o virus de campo.
- Negativo: Negativo o exposición a la vacuna o virus de campo demasiado reciente para ser detectada.
La tabla 2 ayuda a demostrar las capacidades DIVA (diferenciación entre animales infectados de vacunados) de algunos ensayos ELISA cuando se utiliza una vacuna con genes delecionados.
| ELISA no diferencial | Resultado ELISA-E2 | Interpretación |
|---|---|---|
| Positivo | Positivo | Animal expuesto al virus de campo |
| Positivo | Negativo | Animal vacunado no expuesto al virus de campo |
| Negativo | Positivo | Error del ensayo, este resultado no es posible |
| Negativo | Negativo | Animal no vacunado y no expuesto al virus de campo |
VN
- Positivo: Anticuerpos maternales o exposición anterior (>21 días) a vacuna o virus de campo.
- Negativo: Negativo o exposición a la vacuna o virus de campo demasiado reciente para ser detectada.
Escenarios
Es importante tener en cuenta que algunos países pueden exigir la aprobación de la autoridad competente antes de poder realizar cualquier prueba de PPC.
Sospecha de brote agudo de PPC en cerdos de cualquier edad y granjas no vacunadas contra la PPC
- Recoge sangre de varios animales afectados y analízala mediante PCR; se puede considerar agrupar muestras.
- Recoge bazos y tonsilas de cerdos muertos y analízalos mediante PCR; se puede considerar agrupar muestras.
Sospecha de brote agudo de PPC en cerdos de cualquier edad y granjas vacunadas contra la PPC
- Recoge sangre de varios animales afectados que no han sido vacunados contra la PPC en las últimas 2 semanas y analízala mediante PCR; se puede considerar agrupar muestras.
- Recoge bazos o tejidos? y tonsilas de cerdos muertos y analízalos mediante PCR; se puede considerar agrupar muestras.
- Si la PCR es positiva, analiza la muestra de tejido mediante FAT e inmunoperoxidasa con MAbs.
Sospecha de circulación crónica de PPC en cerdos de cualquier edad sin mortalidad y granjas no vacunadas contra la PPC
- Recoge sangre de 30 cerdos con signos clínicos (muestreo dirigido) o seleccionados aleatoriamente (sin signos clínicos) y analízala mediante PCR (se puede considerar agrupar muestras) e individualmente mediante ELISA no diferencial.
Sospecha de circulación crónica de PPC en cerdos de cualquier edad sin mortalidad y granjas vacunadas contra la PPC
- Recoge sangre de 30 cerdos (no vacunados en las últimas 2 semanas) con signos clínicos (muestreo dirigido) o o seleccionados aleatoriamente (sin signos clínicos) y analízala mediante PCR (se puede considerar agrupar muestras) e individualmente mediante ELISA no diferencial y ELISA diferencial E2.