Uso de un nuevo bacteriófago para la detección de Escherichia coli O157:H7
Dandan Zhang, Claudia P. Coronel-Aguilera, Patricia L. Romero, Lynda Perry, Udit Minocha, Carla Rosenfield, Andrew G. Gehring, George C. Paoli, Arun K. Bhunia & Bruce Applegate. The Use of a Novel NanoLuc -Based Reporter Phage for the Detection of Escherichia coli O157:H7. Scientific Reports 6, Article number: 33235 (2016).
doi:10.1038/srep33235
La detección rápida del patógeno transmitido por los alimentos Escherichia coli O157:H7 es de vital importancia para la salud pública en todo el mundo. Entre los métodos de detección, los fagos representan herramientas únicas y sensibles para la detección de E. coli O157:H7 en los alimentos, ya que son específicos de un hospedador y capaces de diferenciar entre células vivas y muertas. Las bacterias diana, tras ser infectadas por el fago diseñado (NanoLuc), se pueden identificar gracias a la expresión de determinados genes del genoma del fago.
El bacteriófago ΦV10 de E. coli O157:H7 se modificó para expresar NanoLuc luciferasa (Nluc), extraída de la gamba de aguas profundas Oplophorus gracilirostris. Una vez infectado por el fago ΦV10, E. coli O157:H7 produce una señal bioluminiscente fuerte tras la adición de luciferina comercial (Nano-Glo®). Los ensayos de enriquecimiento, usando E. coli O157:H7 cultivado en caldo LB (caldo de lisogenia o medio Luria-Bertani) con una concentración de fago de 1,76 × 102 UFP ml-1, son capaces de detectar aproximadamente 5 UFC en 7 horas. Se logró una detección comparable a las 9 horas usando 9,23 × 103 UFP ml-1 de fago en enriquecimientos de cultivo selectivo con carne picada de ternera como matriz alimentaria representativa.
En conclusión, este ensayo de fago NanoLuc parece prometedor para la detección de E. coli O157:H7 en los alimentos de forma sensible, simple y rápida.