Desarrollo de la técnica LAMP para detección de Toxoplasma gondii en carne de cerdo

El ensayo de amplificación isotérmica mediada por loop (LAMP) es un nuevo método que amplifica rápidamente el ADN con una elevada especificidad y sensibilidad bajo condiciones isotérmicas. En este estudio, se estableció un ensayo LAMP con seis cebadores dirigidos a una región altamente conservada de Toxoplasma gondii secuencia ITS-1. El protocolo de amplificación se completó en 30 minutos bajo condiciones isotérmicas en un baño de agua a 65 °C y las pruebas de especificidad no confirmaron reactividad cruzada con plantillas de ADN de Neospora caninum, Eimeria tenella, Cryptosporidium parvum, Listeria monocytogenes y Streptococcus suis. El límite de detección del ensayo LAMP fue de 0,9 fg de ADN genómico de T. gondii, una sensibilidad 10 veces superior a la de un ensayo de PCR convencional. Tanto el ensayo LAMP como la PCR convencional se aplicaron para detectar ADN genómico de T. gondii en 118 muestras de diafragma obtenidas de granjas de cerdos en la provincia de Zhejiang, China. Los resultados mostraron que el LAMP es más sensible que la PCR convencional (13,56% y 9,32%).