El examen del semen a través del microscopio es una fase esencial de la inseminación ya que será a partir de esta observación que decidiremos si utilizar o no el semen recogido. Lo primero a observar será el porcentaje de espermatozoides vivos así como su motilidad. Para poder realizar esta observación es preciso disponer de un microscopio de buena calidad y poder controlar la temperatura durante el examen a través de una platina térmica.
Laboratorio y equipo laboratorial
El laboratorio debe responder a varios imperativos:
- No debe ser muy espacioso ya que sólo se destinará a este único uso.
- Las superficies deberán ser fácilmente lavables y desinfectadas como por ejemplo suelos y paredes embaldosadas, paredes pintadas con pintura lavable o fregadero embaldosado o con recubrimiento sintético.
- Tener armarios para poder guardar todo el material.
- Con mucha luz para poder trabajar adecuadamente.
- Mantener una temperatura estable entre 20 y 25 ºC durante todo el año.
Plano de un laboratorio
Laboratorio luminoso y fácil de limpiar
Examen microscópico
1. Preparación del portaobjetos.
• Durante todo el examen microscópico el semen se mantendrá a 35 °C al baño María habiendo comprobado previamente la temperatura durante la recogida para evitar un choque térmico.
• Para realizar un examen de forma correcta sólo se necesita una pequeña cantidad de semen con el objetivo de evitar la presencia de "capas" de espermatozoides. Para obtener la cantidad correcta se puede utilizar la técnica de las 3 gotas tras haber introducido un agitador de vidrio en el semen o bien utilizar un tubo capilar o bien una micropipeta automática.
• Una vez tenemos la muestra, se cubre con el cubreobjetos y se coloca sobre la platina del microscopio. Para no obtener valores falsos de motilidad debemos:
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2. La puntuación «en teoría»
El examen del semen se realiza a 200 aumentos y el operario debe poder evaluar el movimiento de los espermatozoides.
• Los espermatozoides inmóviles se consideran como muertos. La estimación de espermatozoides vivos se basa en la estimación inicial del número total de espermatozoides de un campo al microscopio (80 a 100) menos el recuento visual en ese campo de los espermatozoides inmóviles. Esta medida se realiza en varios campos sucesivos (5). Debido a la dificultad de realizar esta estimación, la nota se da en porcentajes de 10%: 60%, 70%, 80% o 90%. • La motilidad se basa en la estimación del desplazamiento de los espermatozoides vivos partiendo del principio según el cual cuanto más rápido y rectilíneo sea el desplazamiento mayor será su potencial fecundante (ver la maduración epididimaria, capítulo 2).
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3. La puntuación «a la práctica»
Realizar el examen de motilidad no se aprende en los libros ya que necesita mucha práctica.
La cafeína estimula el movimiento de los espermatozoides y permite apreciar su potencial, encubierto algunas veces por el propio azar del examen. |
Puntuación de 3,5 a 4 |
Puntuación de 3 |
Puntuación de 3 |
Puntuación de 2 |
Puntuación de 2 |
Puntuación de 2 |
Puntuación de 1 |
Puntuación de 1 |
Puntuación de 0 a 1 |
¡¡¡A tener en cuenta!!!
A continuación se presentan 3 muestras de semen clasificado según porcentaje de espermatozoides vivos y motilidad. Precisar que no se trata de tener en cuenta las anomalías ni la higiene del semen. Se observan espermatozoides aglutinados («en paquetes») que se consideran como muertos:
Puntuación de 3 y 90 % de vivos |
Puntuación de 4 y 90 % de vivos |
Puntuación de 2 y 50 % de vivos |