Detección de anticuerpos frente a M.hyo:Comparación de dos kits ELISA de diagnóstico

La Neumonía Enzoótica, o neumonía por micoplasma de los cerdos, es una enfermedad crónica con una elevada morbilidad y baja mortalidad. Está provocada por Mycoplasma hyopneumoniae. Los síntomas clínicos incluyen la tos improductiva crónica, retraso del crecimiento, lento comienzo y lenta difusión de la enfermedad, y aparición repetidas veces de los signos de la enfermedad. Se necesita una prueba serológica específica y sensible para la detección de anticuerpos frente a Mycoplasma hyopneumoniae en suero porcino para hacer una vigilancia y un diagnóstico preciso de la enfermedad. Los métodos tradicionales para el diagnóstico de la Neumonía Enzoótica en el laboratorio mediante pruebas serológicas son: la técnica de fijación al complemento (FC), técnica de hemoaglutinación indirecta (HAI) y, más recientemente, la técnica ELISA.

Se evaluaron dos diagnósticos comerciales existentes en el mercado: el kit ELISA para Mycoplasma hyopneumoniae de Dako, y un kit ELISA para Mycoplasma hyopneumoniae de un competidor.

Este estudio comparó los resultados de la prueba ELISA de Dako ("Kit A") con los de un kit comercial ("Kit B").

Para el estudio se utilizó suero de 101 cerdos de 17 granjas distintas. Todas las granjas estaban calificadas como "exentas de Mycoplasma hyopneumoniae", según los datos obtenidos por las inspecciones veterinarias clínicas periódicas, examen e lesiones en mataderos y por controles serológicos.

Al realizar la prueba con el kit de Dako, el 100% de las muestras dio un resultado negativo con respecto a Mycoplasma hyopneumoniae, de modo que los resultados de la prueba ELISA se correspondían con la situación conocida de las granjas con respecto a Mycoplasma hyopneumoniae. Cuando se examinaron las mismas muestras con la prueba ELISA del kit B, solamente el 70% de las muestras dieron resultado negativo, un 25% fueron positivas y un 5% poco concluyentes.

Por otra parte, considerando los resultados en las granjas, se registró un falso positivo en 13 de 17 de las explotaciones con el Kit B.

Tabla 2. Resultados de las técnicas ELISA de detección de anticuerpos de DAKO y del KIT B frente a Mycoplasma hyopneumoniae, en base a las granjas.

Conclusiones

Cuando se analizaron las muestras con el Kit B, aparecieron falsos positivos (y no concluyentes), pero no cuando se utilizó el kit de Dako. Esto pone de relieve la importancia de validar los kits de diagnóstico antes de utilizarlos si se trata de productos comerciales. Además, especialmente en el caso de infecciones por M.hyopneumoniae, la declaración de la situación de la explotación con respecto a M. hyopneumoniae se debe basar en resultados en los que se tengan en cuanta los exámenes clínicos, el examen post-mortem, el examen de los pulmones en el matadero y pruebas serológicas, y nunca una sola prueba de diagnóstico.